HILIC-P und HILIC-A

für polare und ionische Substanzen

HILIC = Hydrophile Interaktionschromatographie ist eine komplementäre Technik zur RP-LC. Bei RP werden sehr polare und ionischen Substanzen an den hydrophoben stationären Phasen zu schnell eluiert und dadurch schlecht oder gar nicht getrennt. An unmodifiziertem Silika (Kieselgel) können polare Substanzen nur mit organischen Eluenten (ohne Wasser) eluiert werden, die NP-LC ist somit nicht geeignet für wasserlösliche polare Substanzen, die teilweise von der Si-Oberfläche gar nicht eluiert werden. Die HILIC Phasen sind sehr polar, erlauben aber auch wässrige Eluenten. So können polare und ionische Verbindungen (wie auch bei RP) mit Gemischen von Acetonitril/Wasser chromatographiert werden: isokratisch (organische Eluenten mit 5-20% Wasser) oder in Gradienten-Mode bei Steigerung des wässrigen Eluentenanteils (invers der RP-Technik). Die Peak-Elutionsreihe ist  umgekehrt, als bei der RP-Mode. Die Reprospher HILIC-Phasen können ohne Puffer benützt werden, sie liefern hohe Selektivität und Reproduzierbarkeit. Sie basieren auf ultrareinem >99.99% Kieselgel (Metalle insgesamt < 10ppm), dies und der geringere Wasseranteil des Eluenten (gegenüber RP) ermöglichen eine erhöhte Sensitivität für LC/MS-Messungen. Die Reprospher HILIC-P und -HILICA Phasen sind in HPLC-Säulen, Flash-Kartuschen und an DC-Platten erhältlich.

HILIC-P                                                                                   HILIC-A

HILIC-P kann u.a. für polare Peptide und Nukleinbasen (Adenin, Cytosin, Guanin, Thymin, Uracil) benützt werden, HILIC-A ist u.a. für Säuren und Nukleinbasen geeignet:

HILIC-P, 5 µm, 250 x 4 mm;  Eluent: ACN / H₂O  85:15;  Fluss: 0.7 ml/min;  Detektion: 210 nm 

HILIC-A, 5 µm, 250 x 4 mm;  Eluent: ACN / H₂O  95:5;  Fluss: 0.7 ml/min;  Detektion: 210 nm      

HILIC-A, 5 µm, 250 x 4 mm;  Eluent: ACN / H₂O  80:20;  Fluss: 0.7 ml/min;  Detektion: 210 nm